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關于衍生化技術的知識分享

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  衍生化技術就是通過化學反應將樣品中難于分析檢測的目標化合物定量的轉化成另一易于分析檢測的化合物,通過后者的分析檢測可以對目標化合物進行定性和(或)定量分析。該技術在色譜分析中得到廣泛應用。按衍生化反應發生在色譜分離之前還是之后進行,可將衍生化分為柱前衍生化和柱后衍生化。
 
  柱前衍生化的目的
 
  柱前衍生化就是在色譜分離之前將樣品與一定的化學試劑發生化學反應,將樣品中的目標化合物制備成適當的衍生物,然后再用色譜進行分離檢測。
 
  衍生化實驗分類?什么是衍生化?
 
  ①將一些不適合某種色譜技術分析的化合物轉化成可以用該種色譜技術分析的衍生物。如某些高沸點、不汽化或熱不穩定的化合物不能用氣相色譜分析,通過衍生化轉化成可以汽化的或熱穩定的衍生物,然后再用氣相色譜分析。
 
  ②提高檢測的靈敏度(降低檢測限),如液相色譜的紫外檢測器靈敏度很高,但很多化合物沒有紫外吸收或紫外吸收很弱,可以通過衍生化反應給這些化合物接上一個有強紫外吸收的基團,提高了這些化合物的檢測靈敏度。又如氣相色譜的電子捕獲檢測器(ECD)對含鹵素的化合物有很高的靈敏度,可以通過衍生化反應將一些化合物接上鹵素基團,提高這些化合物的檢出靈敏度。
 
  ③改變化合物的色譜性能,改善分離度。如一些異構體在色譜上很難分離,通過衍生化反應,使兩個異構體生成的衍生物色譜性能產生較大差異而得到分離。對一些難分離的物質對也可以選用某些衍生化試劑,只使其中一個發生衍生化反應轉化成衍生物,兩者可得到分離。
 
  ④利用衍生化反應可以幫助化合物結構的鑒定,這點在使用色譜& 質譜,色譜& 紅外光譜和色譜& 核磁共振波譜聯用方法確定化合物結構時作用更加明顯。
 
  不同模式的色譜柱前衍生化的目的有不同的側重,氣相色譜中柱前衍生化主要是改善目標化合物的揮發性;而液相色譜和薄層色譜中柱前衍生化的主要目的是改善檢測能力。所以不同模式的色譜柱前衍生化的方法和所有的衍生化試劑也略有不同。 2. 柱前衍生化的條件
 
  色譜中柱前衍生化使用的衍生化反應應滿足以下幾個條件:
 
  ①反應能迅速、定量的進行,反應重復性好,反應條件不苛刻,容易操作。
 
  ②反應的選擇性高,最好只與目標化合物反應,即反應要有專一性。
 
  ③衍生化反應產物只有一種,反應的副產物和過量的衍生化試劑應不干擾目標化合物的分離與檢測。
 
  ④衍生化試劑應方便易得,通用性好。
 
  總之,柱前衍生化可以擴大色譜分析的應用范圍,使色譜分析的結果能更令人滿意,所以柱前衍生化是色譜樣品處理的一個重要方法。在衍生化反應中,并非所有的衍生化試劑都要反應掉,通常我們加入的衍生化試劑的量要過量, 有時甚至加入的量很大,而真正參加反應的則很少,只要衍生化產物的出峰時間不與其他的峰重合就可以。




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